慢病毒

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慢病毒载体（Lentiviral vectors，LV）是在人免疫缺陷病毒（HIV-1）基础上改造而成的病毒载体系统，能非常高效地将外源基因稳定整合进入哺乳动物细胞中，对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。因其对目的基因的灵活选择性，现广泛应用于稳定转基因过表达、持续基因沉默、基因编辑、动物免疫、成像示踪、诱导多功能干细胞修饰等研究领域。

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复百澳生物可提供丰富的慢病毒产品，20000+现货产品库可供选择；涵盖慢病毒过表达、干扰、敲除等不同使用场景；支持产品定制，全面满足客户需求。

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产品优势

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• 支原体检测阴性：严格支原体检测，确保产品安全
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• 载体容量大：可插入外源基因3-4kb
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• 滴度高：产品滴度可达1×10⁹ TU/ml
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• 实验周期快：定制产品周期10个工作日起
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• 严格质控：10项流程质控、6项质量检测
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• 特异靶向：多种类型病毒外壳可供选择
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包装系统

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注意：第三代包装体系专一性较强，仅适配第三代转移载体；而第二代体系具备更广泛的兼容性，可同时支持第二代和第三代转移载体。第三代转移载体在5'LTR区域进行了关键性改造，其U3元件被替换为CMV或RSV等外源强启动子。这种结构优化使得病毒基因组的转录过程摆脱了对Tat蛋白的依赖性，因此第三代包装系统的核心质粒组件中不再包含Tat蛋白编码序列。相比之下，第二代转移载体保留了完整的野生型LTR结构（包含U3-R-U5元件），其转录激活必须依赖Tat蛋白的反式调控作用。

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服务内容

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产品类型	服务类型	交付标准	产品滴度	周期	产品应用
慢病毒（LV）\n\n（过表达、干扰、敲除）	定制服务	1×10⁸ TU	≥1×10⁸ TU/ml	2周起	细胞转导
慢病毒（LV）\n\n（过表达、干扰、敲除）	定制服务	1×108-9TU	≥1×108-9 TU/ml	2周起	体内注射

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慢病毒感染细胞实验流程

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一、细胞接种

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待细胞生长状态良好时，按实验需求接种至对应规格培养器皿；接种次日开展病毒感染操作时，细胞汇合度控制在 40%~50% 为适宜感染密度。

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二、细胞感染

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1. 感染液配置：\n\n病毒感染液=病毒原液+完全培养基（助感染试剂、血清和培养基等）
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2. 计算病毒用量：病毒用量 =（细胞数量 × MOI值） / 病毒滴度
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3. 加入感染体系：去除细胞原培养基，加入病毒感染液
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三、继续培养

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8-16h后更换新鲜培养基继续培养

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四、确认表达效果

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感染72h后进行基因表达检测或功能性实验

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特殊细胞注意事项

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一、悬浮细胞

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感染悬浮或半悬浮细胞，建议通过平角离心转染法，先重悬细胞，然后将适量的病毒液加入细胞培养皿后，封好口，放入平角离心机，低速（1200g）离心1h，然后放入培养箱中正常培养即可。若由于实验条件有限，没有平角离心机，可用离心管代替，将细胞吹打吸入离心管中，进行低速离心，去掉大部分上清，然后加入适量的病毒液，室温放置15 min（尽量不要超过30 min），然后将细胞和病毒液同时吸出转入培养皿中继续病毒感染过夜即可。

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二、极难感染的细胞

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对于极难感染的细胞，可采用多次感染的方法，即感染一次后，重新加入新鲜病毒再次感染，可显著提升感染效率。

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注：多次感染的时间间隔需要根据细胞状态来调整，要保证每次感染前细胞处于较良好状态。

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三、传代能力较差的原代细胞、非分裂细胞

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原代细胞：由于细胞增长缓慢，可以在接种时提高汇合度到50%~60%，确保在感染后4天时细胞汇合度达到90%~100%；

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非分裂细胞：如神经元细胞，接种后不再增殖，需要按照100%的汇合度进行接种。

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常见的细胞感染MOI参考值

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细胞名称	种属	细胞中文名	MOI值
5637	人源	人膀胱癌细胞株	10
7402	人源	人肝癌细胞	10
293T	人源	人胚肾上皮细胞	1
5-8F	人源	人鼻咽癌细胞株	100
95D	人源	人肺巨细胞癌	2
A375	人源	人黑色素瘤	10
A498	人源	人肾癌细胞	100
A549	人源	人肺腺癌	20
A673	人源	人横纹肌瘤细胞	10
AGS	人源	人胃癌细胞	100
COC1	人源	人卵巢癌	>100
EC9706	人源	人食管癌细胞	10
H-125	人源	人肺癌细胞	>100
HepG2	人源	人肝癌细胞	10
U251	人源	人脑胶质母细胞瘤	1
B16	鼠源	小鼠黑色素瘤细胞	>100
4T1	鼠源	小鼠乳腺癌细胞	>100
NIH-3T3	鼠源	小鼠成纤维细胞系	20
BRL	鼠源	大鼠肝细胞	20
GH3	鼠源	垂体腺瘤细胞	100
NR8383	鼠源	大鼠肺泡巨噬细胞	1

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更多细胞感染MOI值推荐可咨询 19901470581

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特殊细胞注意事项

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一、悬浮细胞

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感染悬浮或半悬浮细胞，建议通过平角离心转染法，先重悬细胞，然后将适量的病毒液加入细胞培养皿后，封好口，放入平角离心机，低速（1200g）离心1h，然后放入培养箱中正常培养即可。

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二、极难感染的细胞

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对于极难感染的细胞，可采用多次感染的方法，即感染一次后，重新加入新鲜病毒再次感染，可显著提升感染效率。

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三、传代能力较差的原代细胞、非分裂细胞

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原代细胞由于细胞增长缓慢，可以在接种时提高汇合度到50%~60%；非分裂细胞如神经元细胞，接种后不再增殖，需要按照100%的汇合度进行接种。

","cases":"流式分析

应用案例

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Q1：慢病毒适合哪些实验？
\nA：慢病毒具有较好的细胞转导能力，并可实现相对稳定的基因表达，常用于基因过表达、基因敲低、CRISPR相关研究、稳定细胞株构建等实验。

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Q2：慢病毒定制需要提供哪些信息？
\nA：通常需要提供目的基因/序列、载体功能需求、启动子、标签或筛选标记、目标细胞及预期用量等信息。若暂不确定载体方案，也可根据实验目的协助完成载体设计与选型。

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Q3：慢病毒产品如何选择合适的滴度和规格？
\nA：主要根据目标细胞类型、感染难度、实验规模及使用方式确定。不同细胞对慢病毒的敏感性和转导效率存在差异，可根据您的细胞体系和实验需求推荐合适的滴度及包装规格。

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