慢病毒滴度检测试剂盒

所属分类:试剂盒产品

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产品列表(共 1 个)

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慢病毒滴度(HIV-1 p24)检测试剂盒(酶联免疫吸附法)适用于任何基于HIV-1的慢病毒的p24蛋白浓度测定。p24蛋白是HIV病毒颗粒中高度保守的主要结构蛋白,其含量与病毒颗粒的数量密切相关。通过测定p24蛋白的浓度,可以间接反映慢病毒载体的滴度。

本试剂盒采用夹心ELISA方法,抗HIV-1 p24特异性抗体预包被在高亲和力的酶标板上,酶标板孔中加入校准品、待测样品,经过孵育,样品中存在的HIV-1 p24蛋白与包被在酶标板上的抗HIV-1 p24抗体结合。洗涤去除未结合的物质后,加入生物素标记的抗HIV-1 p24抗体。洗涤去除未结合的物质后,加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素。洗涤后,加入TMB底物显色液,避光显色。加入终止液终止反应,在450 nm波长测定吸光度值。根据校准曲线计算待测样品中的p24蛋白浓度。

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  1. 检测快速:实验过程约3小时即可完成,即用型ELISA试剂盒,样品处理快速简便;
  2. 灵敏度高:检测限(LOD)为0.861 pg/mL,定量下限(LLOQ)为3.125 pg/mL;
  3. 定量范围宽:定量范围3.125~200 pg/mL,校准曲线R²>0.99;
  4. 专属性强:10 ng/mL的BSA及多种细胞蛋白(C8166、Vero、HEK293、HEK293T、BHK-21)检测结果均低于定量下限,批内/批间准确度%RE<±20%。
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需要准备的材料和仪器\n
以下材料试剂盒中未提供,实验前请额外准备:\n
•酶标仪(备注:可检测450 nm吸光度)。\n
•纯化水(或蒸馏水、去离子水)。\n
•准备试剂用的试剂瓶、离心管、量筒、烧杯等。\n
•加样槽。\n
•移液器吸头。\n
•单通道和多通道移液器。\n
•吸水纸。\n
•计时器。\n
•冰箱(储存样品及试剂盒)。\n
•恒温培养箱(或其它类似设备,如生化培养箱等)。\n

实验试剂的准备 \n
检测前请将所有的试剂、样品恢复至室温。 \n
如果浓缩的试剂出现结晶,需37℃温浴,直至结晶全部溶解。\n
10 ×Wash Buffer用纯化水(或蒸馏水、去离子水)将10 × Wash Buffer稀释至1 × Wash Buffer(如:60 mL 10 × Wash Buffer加入到540 mL纯化水中)。将1 ×Wash Buffer轻轻的混匀,备用(1 × Wash Buffer在2~8℃冰箱中可保存2周)。

实验试剂的准备 \n
推荐使用新鲜实验样品。 \n
注意:\n
•本试剂盒适用于快速检测任何基于HIV-1的慢病毒的p24蛋白浓度测定。样品应分装并贮存于-20℃,以避免样品中待测物活性的丢失。如果在8小时内检测,样品可以存放在2~8℃冰箱中。
•避免样品反复冻融。检测前,冷冻样品应梯度恢复至室温,全部溶解后轻轻地混匀。 \n
•若检测具有高浓度p24蛋白的样品(p24蛋白浓度>200 pg/mL的样品),须在测定前使用Assay Buffer对样品进行稀释(根据样品情况,建议首次检测时10倍稀释1~5个梯度,确保在校准曲线范围内产生至少1个稀释后的样品),以获得准确的p24蛋白浓度。

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