HIV中和抗体假病毒

{"display_name":"HIV中和抗体假病毒","page_subtitle":"HIV-1 Neutralizing Antibody Pseudovirus","cta_title":"立即咨询","cta_subtitle":"如需获取HIV中和抗体假病毒产品方案或定制服务，欢迎联系我们","cta_btn_text":"联系我们","cta_btn_url":"/contact.html","overview":"

本产品是以人类免疫缺陷病毒I型（HIV-1）的结构蛋白（gag-pol）和包膜糖蛋白（Env）共同在HEK-293T细胞内表达后，自我组装并包裹表达报告基因的核酸，形成病毒样颗粒（Virus-like Particle，VLP）。该假病毒结构高度类似活病毒，可模拟真病毒与受体结合并诱导膜融合进入细胞的过程，具有单轮感染能力，可表达(ZsGreen)绿色荧光或荧光素酶（Luciferase）。该产品生物安全性等级低，安全性好，操作简单。

预期用途

• 抗HIV-1血清中和抗体效价测试；
• 抗HIV-1单克隆抗体滴度检测。

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1. 支持广谱中和抗体研究
\n适用于HIV抗体筛选、功能评价及疫苗相关研究。

\n

2. 模拟病毒进入关键过程
\n基于病毒包膜介导的进入机制，实现抗体中和能力评价。

\n

3. 支持多类型抗体检测
\n满足不同来源抗体样品的功能分析需求。

","service_content":"

产品系列

HIV-1中和抗体假病毒提供Luciferase（FNV5011L）与zsGreen（FNV5011G）两种报告基因版本，用于HIV疫苗免疫效果评价与中和抗体检测。

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实验材料

实验试剂：293T-CCR5-CD4细胞、DMEM、胎牛血清、PBS、0.25%胰酶、血清或抗体、荧光素酶检测试剂。

实验设备：生物安全柜、荧光倒置显微镜、CO₂细胞培养箱、离心机、多功能酶标仪、水浴锅、移液器（单道、多道）、电动移液器、96孔板、酶标板。

实验步骤（以血清样本为例）

1. 细胞铺板：取对数生长期的293T-CCR5-CD4进行胰酶消化，计数后制成1×10⁵ cells/mL细胞悬液，96孔板每孔接种100 µL细胞液，置于37℃、5% CO₂细胞培养箱中继续培养。
2. 血清准备：a）血清样品置于56℃水浴锅中加热30 min（建议加热，去除补体干扰）；b）稀释：使用DMEM培养基对血清样本进行稀释，分别进行系列梯度稀释，作为独立血清样品进行中和抗体检测。
3. 假病毒稀释：从-80℃超低温冰箱中取出假病毒置于冰上或4℃条件下融化，待其完全融化后短暂离心，使病毒液聚集于保存管底，依据报告中假病毒滴度和实验方案设计进行系列稀释（1TCID50=1荧光斑点）；建议96孔板每孔加入0.1 µL假病毒液。因假病毒对不同来源的293T细胞感染效率不同，建议正式实验前进行预实验，以确定最适病毒量。
4. 待测血清样品和假病毒稀释液预孵育：将稀释的待测血清样品与假病毒稀释液进行等体积混合，同时设置细胞对照（DMEM培养基，100 µL/well）、假病毒对照（假病毒稀释液与DMEM培养基等体积混合），放入37℃、5% CO₂培养箱中孵育1 h。
5. 感染细胞：孵育结束后各取100 µL混合液（包括细胞对照、假病毒对照）贴壁缓慢加入已经接种好细胞的96孔板对应孔中，贴着工作台面轻轻划“十”字混匀，放入37℃、5% CO₂培养箱中培养72 h。
6. 感染检测：病毒感染细胞72 h后，取出96孔板置于荧光倒置显微镜下观察绿色荧光蛋白表达效率，拍照记录；使用Elispot荧光斑点计数仪进行检测，计算感染抑制率（%）。
7. 结果判定：中和抗体检测实验过程中需设置假病毒对照、细胞对照，来判定实验是否成立。

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1. 1）因细胞水平检测受细胞类型、细胞培养状态、环境条件等影响较大，客户需要根据自身条件确定细胞量、病毒加入量等关键实验参数；建议提前进行预实验，通过预实验计算出合适的假病毒使用浓度；
2. 2）本产品仅供HIV-1抗血清或中和抗体滴度体外检测；
3. 3）假病毒、待测样本避免反复冻融，建议启用后依据实验需求分装储存；
4. 4）血清梯度稀释时注意不要产生气泡；
5. 5）所有实验操作过程均需要在生物安全柜内进行，实验过程中产生的废弃物均需进行高压灭菌处理；
6. 6）假病毒为微量体积，使用前请短暂离心后再取样进行操作。

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Q1：HIV中和抗体假病毒主要用于什么研究？
\nA：HIV中和抗体假病毒主要用于HIV感染机制研究、广谱中和抗体筛选、疫苗研发及免疫评价等。

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Q2：HIV假病毒体系有什么优势？
\nA：HIV假病毒可模拟病毒进入细胞过程，并支持不同包膜蛋白介导的感染评价，是HIV抗体功能研究中常用的实验工具。

\n

Q3：HIV假病毒可以检测不同抗体样品吗？
\nA：可以，可用于不同来源抗体样品的中和活性比较和功能评价。

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