AAV中和抗体假病毒

{"display_name":"AAV中和抗体假病毒","page_subtitle":"AAV Neutralizing Antibody Pseudovirus","cta_title":"立即咨询","cta_subtitle":"如需获取AAV中和抗体假病毒产品方案或定制服务，欢迎联系我们","cta_btn_text":"联系我们","cta_btn_url":"/contact.html","overview":"

本产品是以腺相关病毒为骨架，根据靶向需求替换不同血清型衣壳蛋白，两者结合产生的嵌合病毒。该假病毒结构仅具有单轮感染能力，可模拟野生病毒进入细胞后与抗体中和的过程，同时该假病毒包含荧光素酶（Luciferase）报告基因核酸序列，方便对后续中和实验数据整理分析。本产品安全性好，操作简单。

预期用途

• 抗AAV病毒血清中和抗体效价测试；
• 抗AAV病毒单克隆抗体滴度检测。

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1. 支持多血清型检测
\n可针对不同AAV血清型开发中和抗体评价体系。

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2. 评估抗AAV免疫影响
\n帮助分析预存抗体或免疫反应对AAV递送效果的影响。

\n

3. 服务基因递送研究需求
\n适用于AAV载体开发、免疫评价及递送优化研究。

","service_content":"

产品系列

覆盖AAV2、AAV5、AAV8、AAV9四种常用血清型中和抗体假病毒，均携带Luciferase报告基因，用于AAV病毒血清中和抗体效价测试。

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实验材料

实验试剂：293T细胞、DMEM、胎牛血清、PBS、0.25%胰酶、血清或抗体、荧光素酶检测试剂盒。

实验设备：生物安全柜、荧光倒置显微镜、CO₂细胞培养箱、离心机、多功能酶标仪、Elispot读数仪、水浴锅、移液器（单道、多道）、电动移液器、96孔板、酶标板。

实验步骤（以血清样本为例）

1. 细胞铺板：取对数生长期的293T细胞进行胰酶消化，计数后制成1×10⁵ cells/mL细胞悬液，96孔板每孔接种100 µL细胞液，置于37℃、5% CO₂细胞培养箱中继续培养；
2. 血清准备：a）血清样品置于56℃水浴锅中加热30 min（建议加热，去除补体干扰）；b）稀释：使用DMEM培养基对血清样本分别进行系列梯度稀释，作为独立血清样品进行中和抗体检测。
3. 假病毒稀释：从-80℃超低温冰箱中取出假病毒置于冰上或4℃条件下融化，待其完全融化后短暂离心，使病毒液聚集于保存管底，依据报告中假病毒滴度和实验方案设计进行系列稀释（1TCID50=1荧光斑点）；建议96孔板每孔加入0.1 µL假病毒液。因假病毒对不同来源的293T细胞感染效率不同，建议正式实验前进行预实验，以确定最适病毒量。
4. 待测血清样品和假病毒稀释液预孵育：将稀释的待测血清样品与假病毒稀释液进行等体积混合，同时设置细胞对照（DMEM培养基，100 µL/well）、假病毒对照（假病毒稀释液与DMEM培养基等体积混合），放入37℃、5% CO₂培养箱中孵育1 h。
5. 感染细胞：孵育结束后各取100 µL混合液（包括细胞对照、假病毒对照）贴壁缓慢加入已经接种好细胞的96孔板对应孔中，贴着工作台面轻轻划“十”字混匀，放入37℃、5% CO₂培养箱中培养72 h。
6. 感染检测：病毒感染细胞72 h后，取出96孔板置于荧光倒置显微镜下观察绿色荧光蛋白表达效率，拍照记录；使用Elispot荧光斑点计数仪进行检测，计算感染抑制率（%）。
7. 结果判定：中和抗体检测实验过程中需设置假病毒对照、细胞对照，来判定实验是否成立。

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1. 因细胞水平检测受细胞类型、细胞培养状态、环境条件等影响较大，客户需要根据自身条件确定细胞量、病毒加入量等关键实验参数；建议提前进行预实验，通过预实验计算出合适的假病毒使用浓度；
2. 本产品仅供AAV抗血清或中和抗体滴度体外检测；
3. 假病毒、待测样本避免反复冻融，建议启用后依据实验需求分装储存；
4. 血清梯度稀释时注意不要产生气泡；
5. 所有实验操作过程均需要在生物安全柜内进行，实验过程中产生的废弃物均需进行高压灭菌处理；
6. 假病毒为微量体积，使用前请短暂离心后再取样进行操作。

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Q1：AAV中和抗体假病毒主要用于哪些研究？
\nA：AAV中和抗体假病毒主要用于AAV衣壳免疫原性研究、抗AAV抗体检测、基因递送研究及免疫评价。

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Q2：为什么需要检测AAV中和抗体？
\nA：预先存在或产生的抗AAV抗体可能影响AAV递送效率，因此检测中和抗体水平有助于评估AAV递送效果及免疫相关影响。

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Q3：AAV中和抗体假病毒支持不同血清型检测吗？
\nA：可以。可根据研究需求提供不同AAV血清型相关假病毒体系，用于评价针对不同衣壳类型的中和抗体反应。

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