狂犬中和抗体假病毒

{"display_name":"狂犬中和抗体假病毒","page_subtitle":"Rabies Neutralizing Antibody Pseudovirus","cta_title":"立即咨询","cta_subtitle":"如需获取狂犬中和抗体假病毒产品方案或定制服务，欢迎联系我们","cta_btn_text":"联系我们","cta_btn_url":"/contact.html","overview":"

本产品是以人类免疫缺陷病毒I型（HIV-1）为骨架，表面镶嵌狂犬病病毒囊膜糖蛋白（RV-G）的病毒样颗粒（Virus-like Particle，VLP）。该假病毒结构高度类似活病毒，可模拟真病毒与受体结合并诱导膜融合进入细胞的过程，具有单轮感染能力，同时该假病毒包含绿色荧光蛋白（zsGreen）和荧光素酶（Luciferase）双报告基因核酸序列，方便对后续结果进行评估。该产品安全性好，操作简单。

产品应用

• 抗狂犬病病毒中和抗体效价测试；
• 抗狂犬病病毒单克隆抗体滴度检测。

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1. 支持狂犬抗体功能评价
\n用于狂犬病毒中和抗体检测及免疫效果分析。

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2. 适用于疫苗评价研究
\n可辅助开展疫苗免疫效果及血清样本分析。

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3. 检测应用灵活
\n支持不同研究场景下的抗体活性评价需求。

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产品系列

狂犬病病毒CVS-11株中和抗体假病毒（Pseudovirus-CVS-11-zsGreen-Luciferase），携带zsGreen与Luciferase双报告基因，用于狂犬疫苗免疫效果评价与中和抗体检测。

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实验材料

实验试剂：BHK-21细胞、DMEM、胎牛血清、PBS、0.25%胰酶、血清或抗体、荧光素酶检测试剂盒。

实验设备：生物安全柜、荧光倒置显微镜、CO₂细胞培养箱、离心机、多功能酶标仪、Elispot读数仪、水浴锅、移液器（单道、多道）、电动移液器、96孔板、酶标板。

实验步骤（以血清样本为例）

1. 细胞铺板：取对数生长期的BHK-21细胞进行胰酶消化，计数后制成1×10⁵ cells/mL细胞悬液，96孔板每孔接种100 µL细胞液，置于37℃、5% CO₂细胞培养箱中继续培养。
2. 血清样品准备：a）血清样品置于56℃水浴锅中灭活30 min-1h；b）稀释：使用DMEM培养基对血清样本稀释，分别进行系列梯度稀释，作为独立血清样品或单抗样品进行中和抗体检测。
3. 假病毒稀释：从-80℃超低温冰箱中取出假病毒置于冰上或4℃条件下融化，待其完全融化后短暂离心，使病毒液聚集于保存管底，依据报告中假病毒滴度和实验方案设计进行系列稀释（1TCID50=1荧光斑点）；建议96孔板每孔加入4000 TCID50假病毒液。因假病毒对不同来源的293T细胞感染效率不同，建议正式实验前进行预实验，以确定最适病毒量。
4. 待测样品和假病毒稀释液预孵育：将稀释的待测样品与假病毒稀释液进行等体积混合，同时设置细胞对照（DMEM培养基，100 µL/well）、假病毒对照（假病毒稀释液与DMEM培养基等体积混合），放入37℃、5% CO₂培养箱中孵育1h。
5. 感染细胞：孵育结束后各取100 µL混合液（包括阴性、阳性对照）贴壁缓慢加入已经接种好细胞的96孔板对应孔中，贴着工作台面轻轻划“十”字混匀，放入37℃、5% CO₂培养箱中培养72h。
6. 感染检测：病毒感染细胞72 h后，取出96孔板置于荧光倒置显微镜下观察绿色荧光蛋白表达效率，拍照记录。检测方法一：使用Elispot荧光斑点计数仪进行检测，计算感染抑制率（%）；检测方法二：孔板室温放置30min以平衡至室温，加入与待测细胞培养物等体积并平衡至室温的荧光素酶检测试剂，如96孔培养板可吸取100 µL检测试剂加入100 µL待测细胞培养物中。室温放置3min使细胞充分裂解，使用酶标仪检测其发光值，注意在20 min内完成检测。（荧光素酶检测方法仅供参考，客户可根据实际使用的荧光素酶检测试剂盒操作说明进行实验。）
7. 结果判定：中和抗体检测实验过程中需设置假病毒对照、细胞对照，来判定实验是否成立。

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1. 1）因细胞水平检测受细胞类型、细胞培养状态、环境条件等影响较大，客户需要根据自身条件确定细胞量、病毒加入量等关键实验参数；建议提前进行预实验，通过预实验计算出合适的假病毒使用浓度；
2. 2）本产品仅供狂犬病病毒抗血清或中和抗体滴度体外检测；
3. 3）假病毒、待测样本避免反复冻融，建议启用后依据实验需求分装储存；
4. 4）血清梯度稀释时注意不要产生气泡；
5. 5）所有实验操作过程均需要在生物安全柜内进行，实验过程中产生的废弃物均需进行高压灭菌处理；
6. 6）假病毒为微量体积，使用前请短暂离心后再取样进行操作。

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Q1：狂犬中和抗体假病毒适用于哪些研究？
\nA：主要用于狂犬病毒抗体检测、疫苗免疫评价、中和抗体研究及血清样本分析。

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Q2：狂犬假病毒检测有什么优势？
\nA：相比传统检测体系，假病毒平台可用于更便捷地开展抗体功能评价，为疫苗和抗体研究提供实验支持。

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Q3：狂犬中和抗体假病毒可以用于疫苗评价吗？
\nA：可以，可用于分析免疫后样本中的抗体中和能力，为疫苗免疫效果评价提供参考。

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