HPV中和抗体假病毒

本产品是基于不同型别的人乳头瘤病毒（Human Papilloma Virus，HPV）的衣壳蛋白L1和L2共同在293T细胞内表达后，自我组装形成的病毒样颗粒（Virus-like Particle，VLP），同时将含有报告基因的核酸序列包裹在假病毒内部。该假病毒结构高度类似活病毒，并具有单轮感染细胞活力，可表达报告基因，安全性好。

产品应用

• 用于抗HPV血清中和抗体效价测试；
• 单抗中和抗体滴度检测。

1. 多型别覆盖，支持精准评价
支持不同HPV型别相关假病毒构建，满足不同型别中和抗体检测需求。

2. 模拟病毒入侵过程，评价抗体功能
基于假病毒感染模型，可用于抗体中和活性及免疫保护效果评价。

3. 适用于疫苗与抗体研究
支持HPV疫苗免疫效果评估、候选抗体筛选及功能验证。

产品系列

覆盖HPV 6/11/16/18/31/33/45/52/58共9种型别的中和抗体假病毒，均携带ZsGreen绿色荧光或(Lucifernase) 荧光素酶报告基因，用于HPV疫苗免疫效果评价与中和抗体检测。

实验材料

实验试剂：293T细胞、DMEM培养基、胎牛血清、PBS、0.25%胰酶、血清或抗体、荧光素酶检测试剂盒。

实验设备：生物安全柜、荧光倒置显微镜、CO₂细胞培养箱、离心机、Elispot读数仪、水浴锅、移液器（单道、多道）、电动移液器、96孔细胞培养板。

实验步骤（以血清样本为例）

1. 细胞铺板：取对数生长期的293T细胞进行胰酶消化，计数后制成1×10⁵ cells/mL细胞悬液，96孔板每孔接种100 µL细胞液，置于37℃、5% CO₂细胞培养箱中继续培养。
2. 血清准备：a）血清样品置于56℃水浴锅中加热30 min（建议加热，去除补体干扰）；b）稀释：使用DMEM培养基对血清样本进行稀释，分别进行系列梯度稀释，作为独立血清样品进行中和抗体检测。
3. 假病毒稀释：从-80℃超低温冰箱中取出假病毒置于冰上或4℃条件下融化，待其完全融化后短暂离心，使病毒液聚集于保存管底，依据报告中假病毒滴度和实验方案设计进行系列稀释（1TCID50=1荧光斑点）；建议96孔板每孔加入0.1 µL假病毒液。因假病毒对不同来源的293T细胞感染效率不同，建议正式实验前进行预实验，以确定最适病毒量。
4. 待测血清样品和假病毒稀释液预孵育：将稀释的待测血清样品与假病毒稀释液进行等体积混合，同时设置细胞对照（DMEM培养基，100 µL/well）、假病毒对照（假病毒稀释液与DMEM培养基等体积混合），放入37℃、5% CO₂培养箱中孵育1 h。
5. 感染细胞：孵育结束后各取100 µL混合液（包括细胞对照、假病毒对照）贴壁缓慢加入已经接种好细胞的96孔板对应孔中，贴着工作台面轻轻划“十”字混匀，放入37℃、5% CO₂培养箱中培养72 h。
6. 感染检测：病毒感染细胞72 h后，取出96孔板置于荧光倒置显微镜下观察绿色荧光蛋白表达效率，拍照记录；使用Elispot荧光斑点计数仪进行检测，计算感染抑制率（%）。
7. 结果判定：中和抗体检测实验过程中需设置假病毒对照、细胞对照，来判定实验是否成立。

1. 建议提前进行预实验，通过预实验计算出合适的假病毒使用浓度；
2. 本产品仅供HPV抗血清或中和抗体滴度体外检测；
3. 假病毒、待测血清样本避免反复冻融；
4. 血清梯度稀释时注意不要产生气泡；
5. 所有实验操作过程均需要在II级生物安全柜内进行，实验过程中产生的废弃物均需进行高压灭菌处理，并按医疗废弃物处理要求进行后续处理；
6. 假病毒为微量体积，使用前请短暂离心后再取样进行操作。

Q1：HPV中和抗体假病毒主要用于哪些研究？
A：HPV中和抗体假病毒主要用于HPV感染机制研究、中和抗体评价、疫苗免疫效果评估及抗体筛选等相关研究。

Q2：HPV假病毒中和实验可以评价什么指标？
A：通过检测抗体对假病毒介导感染过程的抑制能力，可用于评价抗体中和活性、相对效价及免疫保护效果。

Q3：HPV中和抗体假病毒可以定制不同型别吗？
A：可以。可根据研究需求提供不同HPV型别、包膜蛋白组合及检测体系的定制服务。